Chromatographie sur
couche mince d'un hydrolysat d'aspartam.
Mode opératoire:
1. hydrolyse de l'aspartam.
- peser 0.1g d'aspartam dans un tube à hémolyse
- ajouter 1 cm3 d'acide chlorhydrique
-
2. chromatographie.
- réactiver les plaques à l'étuve à 105°c
pendant 30 minutes
- préparer la cuve de migration: tapisser la cuve de papier
et verser au fond de la cuve le solvant de chromatographie sur une hauteur
de 1 cm; refermer la cuve et attendre que l'atmosphère de la cuve soit
saturée.
- préparer la plaque de chromatographie: tracer
très légèrement au crayon graphite une ligne de dépôt à 1.5 cm du
bord inférieur de la plaque; marquer les emplacements de 5 dépôts
espacés régulièrement de 1 cm en laissant 1 cm de chaque côté de la
plaque.
- réaliser les dépôts à l'aide d'un capillaire ( un
même capillaire ne sert que pour déposer une seule solution)
chaque dépôt ne doit pas excéder 3 mm de diamètre, il sera
effectué en 3 à 4 fois en séchant entre chaque opération à l'aide
d'un sèche-cheveux.
déposer les solutions dans l'ordre suivant:
- solution de phénylalanine
- solution de proline
- solution d'acide aspartique
- solution d'hydrolysat
de l'aspartam
- solution
de glycine
- placer la plaque dans la cuve et laisser la migration
s'effectuer jusqu'à ce que le front du solvant soit à quelques mm du
bord supérieur de la plaque
- sortir la plaque et marquer immédiatement le front du
solvant au crayon graphite
- sécher la plaque à l'étuve
- pulvériser le réactif à la ninhydrine ( sous hotte) et
après quelques minutes, placer la plaque à l'étuve pendant 3 à 4
minutes à 100°C
Exploitation des résultats:
Calculer le rapport frontal pour chaque acide aminé.
Déduire la nature des composants de l'aspartam.