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Chromatographie sur couche mince d'un hydrolysat d'aspartam.

Mode opératoire:

1. hydrolyse de l'aspartam.
- peser 0.1g d'aspartam dans un tube à hémolyse
- ajouter 1 cm3 d'acide chlorhydrique
-

2. chromatographie.
- réactiver les plaques à l'étuve à 105°c pendant 30 minutes
- préparer la cuve de migration: tapisser la cuve de papier et verser au fond de la cuve le solvant de chromatographie sur une hauteur de 1 cm; refermer la cuve et attendre que l'atmosphère de la cuve soit saturée.
- préparer la plaque de chromatographie: tracer très légèrement au crayon graphite une ligne de dépôt à 1.5 cm du bord inférieur de la plaque; marquer les emplacements de 5 dépôts espacés régulièrement de 1 cm en laissant 1 cm de chaque côté de la plaque.
- réaliser les dépôts à l'aide d'un capillaire ( un même capillaire ne sert que pour déposer une seule solution)
chaque dépôt ne doit pas excéder 3 mm de diamètre, il sera effectué en 3 à 4 fois en séchant entre chaque opération à l'aide d'un sèche-cheveux.
déposer les solutions dans l'ordre suivant:
    - solution de phénylalanine
    - solution de proline
    - solution d'acide aspartique
     - solution d'hydrolysat de l'aspartam
     - solution de glycine
- placer la plaque dans la cuve et laisser la migration s'effectuer jusqu'à ce que le front du solvant soit à quelques mm du bord supérieur de la plaque
- sortir la plaque et marquer immédiatement le front du solvant au crayon graphite
- sécher la plaque à l'étuve
- pulvériser le réactif à la ninhydrine ( sous hotte) et après quelques minutes, placer la plaque à l'étuve pendant 3 à 4 minutes à 100°C

 

Exploitation des résultats:
Calculer le rapport frontal pour chaque acide aminé.
Déduire la nature des composants de l'aspartam.